近期的组织研磨和样品处理分享、讨论，我们邀请到了实验动物监测所老师给大家分享，内容是——小鼠内脏组织样品研磨提取核酸、微生物，研磨使用的仪器是洛尚（LAWSON）组织研磨仪。

实例1：加裂解液直接匀浆

1、取适量组织装入离心管，组织尽量剪碎成小块；

2、在离心管中加入氧化锆珠数颗（一次性使用）；

3、先加入Trizol（不建议加入太多 Trizol，液体体积过大影响匀浆效果），盖好管盖，装入洛尚（LAWSON）组织研磨仪适配器中，安装上机。

4、组织研磨仪研磨参数设置为一定转速，研磨时间为2~5min（不同组织研磨时间不同，脑1min，肝脏、脾脏和肾脏2min、肺脏比较难研磨需3~5min，可能更长，中间应停顿1~2次防止温度过高，研磨前最好先用液氮或放置在-80度冰箱预冷）；

5、再加入适量Trizol至总体积；

6、后面步骤按Trizol说明进行。

实例2：先匀浆，再取一定量液体加裂解液进行核酸抽提，本protocol适用提取小鼠组织中的病毒的核酸

1、取适量组织装入离心管，组织尽量剪碎成小块，样品量较多时使用大离心管；

2、在离心管中加入氧化锆珠数颗，使用大离心管时，可以将氧化锆珠数量增加；

3、加入适量的灭菌PBS或生理盐水，总体积为离心管单管体积的1/3~1/2为好，盖好管盖，装入洛尚（LAWSON）组织研磨仪适配器中，安装上机（研磨前最好先用液氮或放置在-80度冰箱预冷）。

4、洛尚（LAWSON）组织研磨仪参数设置为一定转速，研磨时间为1~5min（不同组织研磨时间不同，脑1min，肝脏、脾脏和肾脏2min、肺脏比较难研磨需3~5min，可能更长，中间应停顿1~2次防止温度过高），若研磨不充分，可以继续研磨到充分为止；

5、一定温度、转速，离心数分钟；

6、取上清液按照试剂盒说明书进行后续提取步骤。 实验1中，我们之前试过一齐加1ml的Trizol，可能是体积过大，反而匀浆效果不好，所以就改成先加一部分裂解先匀浆，然后再补齐1ml体积。